正向筛选 (发现结合分子)
噬菌体文库
靶抗原
特异结合抗体
- 多轮淘选富集,逐步提高特异性
- 监测富集趋势,评估筛选效果
- 保留具有结合信号的阳性克隆
行业通用筛选逻辑:根据抗原形态、背景风险和预期用途组合正向筛选与反向筛选。
噬菌体文库
靶抗原
特异结合抗体
非靶标/同源抗原
保留特异结合抗体(正筛)
去除载体、标签及同源结合(反筛)
证据导向的抗体筛选体系
先确认抗原形态、目标表位、交叉反应边界和后续用途,再制定呈递与验证策略。
将目标富集与标签、载体、同源蛋白或非目标细胞的反向去除组合,提高候选区分度。
获得的抗体片段可追溯到对应序列,支持阳性克隆去重、家族聚类和代表性候选选择。
通过多平台检测结合、特异性和功能等维度,确认候选分子的可靠性。
提供多种抗体格式的表达与纯化衔接,满足不同开发阶段的验证需求。
每个决策节点保留原始数据与分析,支持项目讨论、复核和后续开发。
五步流程:每个阶段均保留执行内容、阶段输出和关键决策依据。
执行内容
确认抗原、预期表位与应用场景;识别标签、载体和同源物风险。
阶段输出
项目评估记录;筛选与验证框架
执行内容
设计固相、液相或细胞呈递方式;设置对照与反筛材料。
阶段输出
呈递方案;实验设计文件
执行内容
执行孵育、洗涤、洗脱与扩增;逐轮调整筛选压力并检测富集。
阶段输出
各轮筛选记录;富集趋势数据
执行内容
单克隆结合检测与对照比较;测序、去重与序列家族聚类。
阶段输出
阳性克隆列表;序列与聚类结果
执行内容
按约定完成复测与分级;整理原始数据、结论和后续建议。
阶段输出
候选清单;数据包与项目报告
它把抗体片段的表型与编码序列连接在同一噬菌体颗粒上,通过抗原结合、洗涤、洗脱和扩增逐轮富集目标结合克隆。
常见项目会进行多轮淘选,但轮数不是固定指标;富集趋势、背景信号和克隆多样性共同决定是否继续或调整策略。
可根据项目评估使用纯化蛋白、结构域、肽段、细胞或其他约定形式;不同形式对构象保持、背景控制和验证方法有不同要求。
可组合预封闭、预吸附、反向筛选、竞争洗脱与逐轮加严洗涤,并设置载体、标签和非目标样品对照。
交付范围在立项时确认。常规可提供约定格式的序列文件与聚类结果;进一步注释、格式转换或表达验证可单独规划。
可以。候选序列可衔接抗体表达制备、亲和力测定、竞争与交叉反应评估,以及按项目目标设计的功能实验。